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Diagnostica Oncoematologica e Biologia Molecolare Programmi Sperimentali

UK NEQAS for Leucocyte Immunophenotyping

Programmi in fase di sviluppo in Diagnostica Oncoematologica e Biologia Molecolare

Sono disponibili esercizi ancora in fase sperimentale, che si spera possano costituire la base per formare nuovi programmi EQA, nei quali i partecipanti contribuiscono alla messa a punto dei dettagli tecnici.
Per l’adesione a questi schemi, che non assegnano punteggi e che possono comportare anche attività analitiche aggiuntive che vanno aldilà degli ordinari esercizi EQA, occorre contattare gli uffici italiani di UK NEQAS.

Pre Pilot Study – Myeloproliferative Neoplasm Gene Panels – Studio pre-pilota: Pannelli di mutazioni genetiche nelle sindromi mieloproliferative croniche (COD EQA06P)
In questo esercizio, un campione clinico o una linea cellulare con alterazioni genetiche sospette per sindromi mieloproliferative croniche verranno distribuiti, assieme ad uno scenario clinico. Ai partecipanti verrà richiesto di analizzare i campioni per le mutazioni di JAK2 (V617F ed Esone 12), Calreticulina e MPL, procedendo secondo la logica dell’algoritmo sviluppato da Tefferi nel 2014 (Tefferi A and Pardanani A. Genetics: CALR mutations and a new diagnostic algorithm for MPN. Nat Rev Clin Oncol 2014; 11(3): 125-126).
Saranno tuttavia accettati anche risultati eseguiti con pannelli genici più ampi.

Pre Pilot Study – Acute Myeloid Leukaemia Gene Panels – Pannelli di mutazioni genetiche della Leucemia Mieloide Acuta in Next Generation Sequencing (NGS)(COD EQA06Q)
Questo programma è diretto prevalentemente agli utilizzatori di pannelli in Next Generation Sequencing (NGS) per la diagnosi e la classificazione prognostica della AML. Ogni esercizio contiene un campione liofilizzato di AML o di una linea cellulare, nel quale i partecipanti dovranno valutare e riportare con i propri sistemi in-house ogni alterazione genica o regolatoria di significato patologico, come mutazioni puntiformi, micro-inserzioni, delezioni e duplicazioni. Non sarà richiesto di valutare alterazioni di maggiori dimensioni coinvolgenti l’architettura del genoma o condizioni in cui il numero di copie sia oltre le 50kb.
L’analisi genetica dei campioni che vengono preparati è affidata ad un provider esterno, ma la valutazione della loro affidabilità d’uso negli esercizi resta comunque sotto la responsabilità di UK NEQAS.

Pre Pilot Study – Cerebrospinal Fluid (CSF) Immunophenotyping – Immunofenotipizzazione delle cellule del Liquor (COD EQA20)
L’infiltrazione degli spazi liquorali da parte di cellule leucemiche è un evento frequente e associato a prognosi negativa. Questo programma è stato sviluppato per stabilire la capacità dei laboratori di identificare e caratterizzare immunofenotipicamente in citometria a flusso cellule leucemiche in campioni di Liquor
Verrà distribuito un campione di leucociti stabilizzati risospesi in un medium che riproduce le caratteristiche del liquor, assieme ad un’immagine digitale di un citospin, utile per una valutazione morfologica preliminare all’analisi fenotipica. Non verranno forniti vetrini di citospin. Si precisa inoltre che i campioni stabilizzati che verranno distribuiti non sono adatti all’allestimento di preparati per analisi morfologiche, potendo generare artefatti.
Ai partecipanti sarà richiesto di analizzare il campione utilizzando le proprie metodologie di routine, per definire l’eventuale presenza di un certo tipo di contaminazione leucemica. Saranno raccolti i dati di conteggio cellulare assoluto, di valutazione morfologica e di analisi immunofenotipica in citometria.

Pre Pilot Study – Haematological Malignancy Bone Marrow Aspirate Assessment – Analisi Citomorfologica dell’Agoaspirato Midollare nelle Neoplasie Ematologiche (COD EQA21)
Questo programma è diretto a valutare nei partecipanti la capacità di identificare correttamente i vari tipi cellulari presenti in un agoaspirato midollare.
Il programma è interamente basato sul web: in ogni esercizio verrà proposta un’immagine ad alta risoluzione, nella quale si dovrà dare una valutazione citomorfologica dell’aspirato, si dovrà fornire il conteggio differenziale globale ed il conteggio della percentuale di blasti, sul totale degli elementi nucleati. Inoltre si dovranno classificare cellule pre-identificate da marcatori e fornire indicazioni su eventuali test aggiuntivi da eseguire a seguito della valutazione morfologica.

Pre Pilot Study – Minimal Residual Disease for Plasma Cell Myeloma by Flow Cytometry – Analisi della Malattia Minima Residua nel Mieloma Multiplo in Citometria a Flusso (COD EQA09C)
L’analisi della malattia minima residua è oggi un indicatore clinico di fondamentale importanza nelle principali neoplasie ematologiche. I risultati di questa analisi hanno un ruolo predittivo per la probabilità di recidiva o per l’instaurazione di uno stato di remissione. L’analisi della malattia residua ha quindi un effetto diretto sulle decisioni cliniche e sul trattamento del paziente.
In questo programma vengono distribuiti campioni di sangue stabilizzato in cui sono stati aggiunti diversi quantitativi di materiale midollare ricavato da pazienti con mieloma. Ai participanti viene richiesto di quantificare il livello di malattia residua in citometria a flusso. Questi campioni non sono adatti all’analisi molecolare di malattia residua.
Ogni esercizio contiene tre campioni: un campione di esordio (tuttavia non agli stessi livelli quantitativi di malattie all’esordio reali) assieme a due campioni di follow-up. I due campioni di follow-up rappresentano diversi stadi di malattia residua registrabili in corso di trattamento, e sono diretti a valutare l’abilità di riconoscere e quantificare la condizione, da definire come percentuale di plasmacellule mielomatose sul totale della popolazione plasmacellulare.

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